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GE percoll細胞分離液17-0891-01幾大要素
點擊次數:1243 發布時間:2018-05-08

GE percoll細胞分離液17-0891-01幾大特點:

特點一:Percoll為低粘度的密度梯度介質,用於分離細胞、亞細胞結構和較大的病毒分子。粘度低,因此使用低的離心力(200-1000× g),隻需幾分鍾就可形成梯度對細胞進行分離。Percoll供貨時已經消毒,並且易於再次消毒。包裝於易打開,並可再次密封的250ml和1升瓶中。

特點二:1、在溫和的條件下,分離細胞、亞細胞結構和較大的病毒分子(可小至~70S),保持其存活和形態的完整性

2、對細胞無毒性

3、可調整到生理狀態下的離子強度和pH

4、使用角轉頭,以中速離心,即可形成梯度

5、等滲梯度,密度zui大可達到1.3 g/ml。

特點三:操作簡單:1.不同濃度(密度)Percoll溶液的製備: 先用9份Percoll與1份8.5% NaCl或1.5MPBS混合達到生理性滲透壓,然後用生理溶液(0.85% NaCl或0.15M PBS)稀釋到所需濃度。
 Percoll濃度(%)  70    60    50    40    30     20
  比重g/ml    1.090 1.077 1.067 1.056 1.043 1.031
2.不連續密度梯度Percoll層的製備: 先將試管壁用牛血清濕潤,除去多餘血清,這種預處理可使逐層疊加的Percoll液平穩沿管壁流下,使形成滿意的界麵。在製備過程中一般用長針頭注射器從高密度向低密度逐層放置,有時相鄰兩層Percoll比重相差不大時,可將Percoll液放入注射器中,小針頭斜麵緊貼管壁,任其自然慢慢流下。
3.裝樣:樣品體積和細胞濃度根據不同細胞而異,一般加樣體積不宜過大,細胞濃度也不可過高,否則會影響細胞的分離和回收。
4.離心:一般采用離心力為400g,時間20~25min。由於多層Percoll之間密度差別不大,因此離心機加速、降速時要慢,要平穩。
5.取樣:當所要分離的細胞絕大部分在兩層的界麵時,可逐層去除Percoll液後收集界麵部位的細胞;有時大部分細胞位於Percoll層中,則需要逐層收集。收獲含有Percoll液的細胞經2次洗滌後可供培養或檢測用。

 

 

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